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蛋白质纯化的一般注意事项【友e家娱乐App下载】
时间:2020-12-15 12:48 点击次数:
本文摘要:蛋白质纯化的一般注意事项进行任何一种蛋白质纯化时,都要时刻注意保证其稳定性,保持其活性。合适的pH,除了层析,要防止所用缓冲液的pH与pI完全相同,以免蛋白质溶解。在细胞内蛋白质的纯化中,再次加入脱氧核糖核酸酶水解脱氧核糖核酸,避免了脱氧核糖核酸对蛋白质的污染。

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蛋白质纯化的一般注意事项进行任何一种蛋白质纯化时,都要时刻注意保证其稳定性,保持其活性。有一些标准化的预防措施必须牢记在心,包括:1。操作人员应尽可能将其放在冰上或冷藏。

蛋白质纯化

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2.不要煮过头,蛋白质浓度保持在 g/ml ~ mg/ml。3.合适的pH,除了层析,要防止所用缓冲液的pH与pI完全相同,以免蛋白质溶解。4.用作蛋白酶抑制剂,避免目标蛋白被蛋白酶水解;在细胞内蛋白质的纯化中,再次加入脱氧核糖核酸酶水解脱氧核糖核酸,避免了脱氧核糖核酸对蛋白质的污染。5.防止样品反复冻融和轻微摇动,防止蛋白质变性。

6.缓冲液的组成尽量模拟细胞内环境。7.在缓冲液中重新加入0.1 ~ 1mol/L DTT(或-巯基乙醇),避免蛋白质水解。8,特别是1 ~ 10mol/L的EDTA金属螯合剂,避免重金属对目标蛋白的损伤。

9、用于消毒液,避免微生物生长。


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